Descrição detalhada
Western blot (WB), imunoensaio em tira (LIATEK HIV Ⅲ), ensaio de radioimunoprecipitação (RIPA) e ensaio de imunofluorescência (IFA).O método de teste de validação comumente usado na China é o WB.
(1) Western blot (WB) é um método experimental amplamente utilizado no diagnóstico de muitas doenças infecciosas.No que diz respeito ao diagnóstico etiológico do HIV, é o primeiro método experimental de confirmação utilizado para confirmar os anticorpos do HIV.Os resultados da detecção de WB são frequentemente usados como o “padrão ouro” para identificar as vantagens e desvantagens de outros métodos de teste.
Processo de teste de confirmação:
Existem tipos mistos de HIV-1/2 e HIV-1 ou HIV-2 simples.Primeiro, use o reagente misto HIV-1/2 para testar.Se a reação for negativa, informe que o anticorpo do HIV é negativo;Se for positivo, informará que é anticorpo HIV-1 positivo;Se os critérios positivos não forem atendidos, considera-se que o resultado do teste de anticorpos do HIV é incerto.Se houver uma banda indicadora específica do HIV-2, você precisa usar o reagente de imunoblotting do HIV-2 para realizar novamente o teste de confirmação do anticorpo HIV 2, que mostra uma reação negativa, e relatar que o anticorpo HIV 2 é negativo;Se for positivo, informará que é sorologicamente positivo para anticorpo HIV-2 e enviará a amostra ao laboratório nacional de referência para análise da sequência de ácidos nucléicos,
A sensibilidade do WB geralmente não é inferior à do teste de triagem preliminar, mas sua especificidade é muito alta.Isso se baseia principalmente na separação, concentração e purificação de diferentes componentes do antígeno do HIV, que podem detectar anticorpos contra diferentes componentes do antígeno, de modo que o método WB pode ser usado para identificar a precisão do teste de triagem preliminar.Pode-se observar pelos resultados do teste de confirmação WB que, embora os reagentes com boa qualidade sejam selecionados para o teste de triagem preliminar, como o ELISA de terceira geração, ainda haverá falsos positivos e resultados precisos só podem ser obtidos por meio do teste de confirmação.
(2) Ensaio de imunofluorescência (IFA)
O método IFA é econômico, simples e rápido, e tem sido recomendado pelo FDA para o diagnóstico de amostras de WB incertas.No entanto, são necessários microscópios fluorescentes caros, técnicos bem treinados e os resultados de observação e interpretação são facilmente afetados por fatores subjetivos.Os resultados não devem ser preservados por muito tempo, e a IFA não deve ser realizada e aplicada em laboratórios gerais.
Relatório de resultados do teste de confirmação de anticorpos do HIV
Os resultados do teste de confirmação de anticorpos do HIV devem ser relatados na Tabela 3 em anexo.
(1) Cumprir com os critérios de julgamento positivo de anticorpo HIV 1, relatar “positivo de anticorpo HIV 1 (+)” e fazer um bom trabalho de consulta pós-teste, confidencialidade e relatório de situação epidêmica, conforme necessário.Cumprir com os critérios de julgamento positivo para anticorpos HIV 2, relatar “positivo para anticorpos HIV 2 (+)” e fazer um bom trabalho de consulta pós-teste, confidencialidade e relatório de situação epidêmica, conforme necessário.
(2) Em conformidade com os critérios de julgamento negativo de anticorpos de HIV e reporte “anticorpos de HIV negativos (-)”.Em caso de suspeita de infecção em “período de janela”, recomenda-se mais testes de ácido nucleico do HIV para fazer um diagnóstico claro o mais rápido possível.
(3) Em conformidade com os critérios para incerteza de anticorpos de HIV, informe “incerteza de anticorpos de HIV (±)” e observe nas observações que “aguarde o reteste após 4 semanas”.