RESUMO E EXPLICAÇÃO DO TESTE
A malária é uma doença hemolítica febril transmitida por mosquitos que infecta mais de 200 milhões de pessoas e mata mais de 1 milhão de pessoas por ano.É causada por quatro espécies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Todos esses plasmódios infectam e destroem os eritrócitos humanos, produzindo calafrios, febre, anemia e esplenomegalia.O P. falciparum causa mais doenças graves do que as outras espécies de plasmódio e é responsável pela maioria das mortes por malária, além de ser um dos dois patógenos mais comuns da malária.
Tradicionalmente, a malária é diagnosticada pela demonstração dos organismos em esfregaços espessos de sangue periférico corados com Giemsa, e as diferentes espécies de plasmódio são distinguidas por sua aparência em eritrócitos infectados.A técnica é capaz de diagnósticos precisos e confiáveis, mas apenas quando realizada por microscopistas qualificados usando protocolos definidos, o que apresenta grandes obstáculos para as áreas remotas e pobres do mundo.
O Teste Rápido Pf Ag foi desenvolvido para solucionar esses obstáculos.Ele detecta o antígeno específico Pf pHRP-II em amostra de sangue humano.Pode ser realizada por pessoal não treinado ou minimamente qualificado, sem equipamento de laboratório.
PRINCÍPIO
O Pf Ag Rapid Test é um imunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.Os componentes da tira de teste consistem em: 1) uma almofada de conjugado cor de vinho contendo anticorpo monoclonal anti-pHRP-II conjugado com ouro coloidal (pHRP II-gold conjugados), 2) uma tira de membrana de nitrocelulose contendo uma banda de teste (Pf) e uma banda de controle (banda C).A banda Pf é pré-revestida com anticorpos policlonais anti-pHRP-II, e a banda C é pré-revestida com IgG anti-rato de cabra.
Durante o ensaio, um volume adequado da amostra de sangue é dispensado no poço da amostra (S) do cassete de teste, um tampão de lise é adicionado ao poço do tampão (B).O tampão contém um detergente que lisa os glóbulos vermelhos e libera o antígeno pHRPII, que migra por ação capilar através da tira mantida no cassete.Se o pHRP-II estiver presente na amostra, irá ligar-se aos conjugados pHRP II-ouro.O imunocomplexo é então capturado na membrana pelos anticorpos policlonais antipHRP II pré-revestidos, formando uma banda Pf cor de vinho, indicando um resultado de teste positivo para Pf.
A ausência da banda Pf sugere um resultado negativo.O teste contém um controle interno (banda C) que deve exibir uma faixa cor de vinho do imunocomplexo de IgG anti-rato de cabra / IgG de camundongo (conjugados pHHRP II–ouro), independentemente do desenvolvimento da cor em qualquer uma das bandas Pf.Caso contrário, o resultado do teste é inválido e a amostra deve ser testada novamente com outro dispositivo.
