RESUMO E EXPLICAÇÃO DO TESTE
A malária é uma doença hemolítica febril transmitida por mosquitos que infecta mais de 200 milhões de pessoas e mata mais de 1 milhão de pessoas por ano.É causada por quatro espécies de Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale e P. malariae.Todos esses plasmódios infectam e destroem os eritrócitos humanos, produzindo calafrios, febre, anemia e esplenomegalia.P. falciparum causa mais doenças graves do que as outras espécies de plasmódio e é responsável pela maioria das mortes por malária.P. falciparum e P. vivax são os patógenos mais comuns, entretanto, há considerável variação geográfica na distribuição das espécies.
Tradicionalmente, a malária é diagnosticada pela demonstração dos organismos em esfregaços espessos de sangue periférico corados com Giemsa, e as diferentes espécies de plasmódio são distinguidas por sua aparência em eritrócitos infectados.A técnica é capaz de diagnósticos precisos e confiáveis, mas apenas quando realizada por microscopistas qualificados usando protocolos definidos, o que apresenta grandes obstáculos para as áreas remotas e pobres do mundo.
O teste rápido Malaria Pf/Pv Ag foi desenvolvido para resolver esses obstáculos.Ele utiliza anticorpos específicos para P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) e para P. vivax Lactate Desidrogenase (Pv-LDH) para detectar e diferenciar simultaneamente a infecção por P. falciparum e P. vivax.O teste pode ser realizado por pessoal não treinado ou minimamente qualificado, sem equipamento de laboratório
PRINCÍPIO
O Malaria Pf/Pv Ag Rapid Test é um imunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.Os componentes do teste de tira consistem em: 1) uma almofada de conjugado cor de vinho contendo anticorpo anti-Pv-LDH de camundongo conjugado com ouro coloidal (conjugados Pv-LDH-ouro) e anticorpo anti-pHRP-II de camundongo conjugado com ouro coloidal (conjugados pHRP-II-ouro), 2) uma tira de membrana de nitrocelulose contendo duas bandas de teste (bandas Pv e Pf) e uma banda de controle (banda C).A banda Pv é pré-revestida com outro anticorpo específico anti-Pv-LDH de camundongo para a detecção de infecção por Pv, a banda Pf é pré-revestida com anticorpos policlonais anti-pHRP-II para detecção de infecção por Pf e a banda C é revestida com IgG anti-camundongo de cabra.
Durante o ensaio, um volume adequado da amostra de sangue é dispensado no poço da amostra (S) do cassete de teste, um tampão de lise é adicionado ao poço do tampão (B).O tampão contém um detergente que lisa os glóbulos vermelhos e libera vários antígenos, que migram por ação capilar através da tira mantida no cassete.Pv-LDH, se presente na amostra, se ligará aos conjugados Pv-LDH-ouro.O imunocomplexo é então capturado na membrana pelo anticorpo anti-Pv-LDH pré-revestido, formando uma banda Pv cor de vinho, indicando um resultado de teste Pv positivo.Alternativamente, pHRP-II, se presente na amostra, se ligará aos conjugados pHRP-II-ouro.O imunocomplexo é então capturado na membrana pelos anticorpos anti-pHRP-II pré-revestidos, formando uma banda Pf cor de vinho, indicando um resultado de teste positivo para Pf.A ausência de quaisquer bandas de teste sugere um resultado negativo.O teste contém um controle interno (banda C) que deve exibir uma faixa cor de vinho do imunocomplexo de conjugados cabra anti-rato IgG/camundongo IgG (anti-Pv-LDH e anti-pHRPII)-ouro, independentemente do desenvolvimento da cor em qualquer uma das bandas de teste.Caso contrário, o resultado do teste é inválido e a amostra deve ser testada novamente com outro dispositivo.
